細胞培養污染的兩種主要形式是化學污染和生物污染。
化學細胞培養污染是指細胞培養物摻入對培養系統產生負面影響的非生命物質。這些物質可能是什么或在哪里可以找到它們?化學污染可能發生在:
1.培養基,用于細胞培養的生長培養基。這是可能發現大多數化學污染物的地方。
2.水:不正確的純凈水,實際上也可能是過度純凈的水。高純水實際上具有很強的反應性,會導致用于創建和維持細胞培養的設備中浸出有毒化學物質。
3.某些類型的血清,一種富含蛋白質的液體。
4.內毒素,是革蘭氏陰性菌的毒素。
5.某些類型的介質暴露在熒光燈下時會產生自由基。
6.重金屬。
7.來自塑料儲存容器和管道的增塑劑。
8.設備上殘留的清潔劑和消毒劑。
另一種主要類型的細胞培養物污染來自生物細胞培養物污染,即通過活生物體摻入細胞培養物,例如:
1.細菌
2.酵母
3.病毒
4..支原體
5.原生動物
6.無脊椎動物
7.來自其他細胞系的交叉污染
這些生物污染物的來源包括從消毒不當的用品和氣溶膠等。#細胞培養瓶#
如何識別細胞培養污染?
識別細胞污染可以通過多種方法檢測生物細胞培養污染。這些方法主要包括:
1.用肉眼目視檢查。例如,混濁的薄膜出現可能表明存在細菌污染。
2.顯微鏡檢查(包括電子顯微鏡、生物顯微鏡),在顯微鏡下可以觀察到許多不同種類的有害污染物的存在,比如:細菌、病毒和酵母菌。
3.測試 pH 值。例如,酵母的嚴重污染可能會增加培養物的 pH 值,而細菌污染會降低 pH 值。
4.采用免疫測定法進行測定,例如 ELISA 或酶聯免疫吸附測定,其中稱為抗體的蛋白質附著在抗原(潛在污染物)上以揭示污染物的存在。
一般情況下,檢測化學污染通常比檢測生物污染困難得多。通常,它歸結為一個清除污染的過程。如果通過上述檢測方法排除了生物污染,那么化學污染就有可能發生。
一旦懷疑,化學污染物的鑒定可能需要以逐步的方式進行,其中對每種可能的化學污染物進行處理和測試。例如,可能需要測試水的純度,或者可能需要建立不同介質、溶液之間的對比實驗等等。
總體來說,細胞培養時,細胞培養物面臨的污染主要包括化學污染和生物污染兩個方面:即化學細胞培養物污染、細胞培養物被重金屬、清潔劑、毒素等非生命物質污染和生物細胞培養污染物、活生物體(如細菌、酵母和真菌)等生物物質污染。
排除細胞污染的主要方法有:可以通過顯微鏡、pH 值測試或 ELISA 等高級測試目視發現生物細胞培養污染物。對于支原體的清除可以使用支原體清除試劑盒。
蘇州阿爾法生物的支原體清除劑、支原體檢測試劑盒廣泛應用于細胞培養污染的防治,細胞生物學研究、新藥開發等場景。